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摘要
目的 构建乳酸乳球菌(Lactococcus lactis, LL)为载体的细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus, Eg)重组LL-Eg95(rLL-Eg95)疫苗，并研究其表达效率。方法 以pCD-Eg95为模板扩增Eg95基因，采用XbaⅠ和HindⅢ双酶切后插入pMG36e，构建重组质粒pMG36e-Eg95，转化大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞，抽提质粒进行双酶切鉴定；电穿孔转化乳酸乳球菌MG1363株，构建细粒棘球绦虫重组LL-Eg95疫苗，抽提质粒进行PCR鉴定。结果 重组质粒用双酶切鉴定可切出预期大小的片段，以具有罗红霉素抗性的重组LL中抽提的质粒为模板进行PCR可扩增出471 bp的Eg95基因；SDS-PAGE显示重组LL可表达相对分子质量为16.5×103的Eg95蛋白，表达蛋白约占菌体总蛋白的17%；免疫印迹表明表达蛋白可被细粒棘球蚴感染的鼠血清识别。结论 成功构建了细粒棘球绦虫重组LL-Eg95疫苗，表达的Eg95具有特异的抗原性。
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单位重庆医科大学附属第一医院
