长链非编码RNA NEAT1通过调控IL-8参与肠上皮细胞抗隐孢子虫反应

作者：李腾; 沈玉娟; 崔丽君; 刘华; 胡媛; 姜岩岩; 曹建平^*

来源：中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(04): 487-492.

• 微小隐孢子虫
• 长链非编码RNA
• lncRNA NEAT1
• IL-8
• 宿主免疫

目的 探索长链非编码RNA NEAT1 (lncRNA NEAT1)在调控宿主细胞抗隐孢子虫免疫反应的作用及其初步机制。方法 采用微小隐孢子虫感染人结直肠癌细胞系HCT-8细胞（卵囊∶细胞比例为2∶1），构建微小隐孢子虫感染肠上皮细胞模型。分别于感染后4 h和36 h观察感染组及未感染对照组的HCT-8细胞生长情况；提取各组细胞总RNA，采用实时荧光定量PCR方法 （qRT-PCR）检测炎性细胞因子白细胞介素-8 (IL-8)的基因表达水平，并动态检测lncRNA NEAT1及其长转录本lncRNA NEAT1＿2的表达。同时利用lncRNA NEAT1抑制剂Smart Silencer体系建立lncRNA NEAT1敲减的细胞模型（lncRNA NEAT1KD），比较其与未敲减对照组细胞IL-8 mRNA的表达水平。结果 微小隐孢子虫卵囊与HCT-8细胞共孵育4 h后，子孢子贴附并入侵细胞，感染组lncRNA NEAT1和lncRNA NEAT1＿2的相对表达量分别为0.467±0.364和0.282±0.230，较对照组（0.960±0.152和0.865±0.219）降低（t=2.780、 3.672, P <0.05）; IL-8相对表达量为1.273±0.647，与对照组（1.017±0.231）差异无统计学意义（t=0.828, P> 0.05）；感染后36 h，隐孢子虫成功侵入宿主细胞并繁殖，感染组细胞lncRNA NEAT1及lncRNA NEAT1＿2相对表达量分别为2.728±0.897和3.303±2.643，较对照组（1.029±0.237和1.000±0.449）均上调（t=4.854, P <0.01; t=2.577, P <0.05）; IL-8相对表达量为6.835±2.065，较对照组（1.046±0.293）上调（t=5.652, P <0.01）。lncRNA NEAT1KD组lncRNA NEAT1及lncRNA NEAT1＿2的相对表达量分别为0.382±0.126和0.312±0.068，较对照组（1.040±0.446和1.005±0.410）下调（t=4.481, P <0.01; t=5.301, P <0.01）。LncRNA NEAT1KD组IL-8 mRNA相对表达量为0.525±0.230，低于对照组（0.959±0.229）(t=4.688, P <0.01)。结论 随着微小隐孢子虫感染进程，感染细胞lncRNA NEAT1的表达动态上调，并通过调控细胞因子IL-8的转录，参与宿主细胞抗微小隐孢子虫免疫应答。

• 单位
  中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所