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摘要
目的:通过单独应用MENK、NTX与联合应用MENK与NTX的体内外实验,探讨MENK、NTX及二者联合时对胰腺癌的抑制作用。方法:体外实验中,MTS方法检测各实验组中胰腺癌增殖细胞的抑制情况;体内实验中,通过建立胰腺癌荷瘤小鼠模型,检测各实验处理组中胰腺癌的抑制情况。WB法检测荷瘤小鼠胰腺癌组织阿片受体蛋白表达量;流式细胞术检测荷瘤小鼠淋巴细胞亚群(CTL、Treg、NK、γδT)的增殖情况。结果:在体外实验中,MENK在浓度为10~(-6)mol/L时对胰腺癌细胞的抑制作用最强;NTX在浓度为10~(-5)mol/L时对胰腺癌细胞的抑制作用最强;二者相比较,MENK的作用更加显著,具有统计学意义(P<0.05);在体内实验中,MENK与NTX联合应用在48小时后与对照组相比较,具有统计学意义(P<0.05),在96小时,与MENK组和NTX组相比较抑癌率升高,具有统计学意义(P<0.05);在体内实验中,在1次/24 h的给药方式下,MENK在剂量为20 mg/kg时抑癌效果最显著;NTX在剂量为5 mg/kg时抑癌效果最显著;MENK组与NTX组相比较作用更加显著,具有统计学意义(P<0.0 5);MENK与NTX联合应用时,MENK在剂量为20 mg/kg 1次/24 h与NTX在剂量为5 mg/kg 1次/96 h给药方式时,抑癌效果最显著,与对照组相比具有统计学意义(P<0.05);Western-blot技术检测荷瘤小鼠肿瘤组织阿片受体的蛋白的表达含量,NTX组与MENK+NTX组肿瘤组织阿片受体蛋白表达量增加,NTX组高于MENK+NTX组,具有统计学意义(P<0.05);流式细胞技术检测荷瘤小鼠淋巴细胞亚群增殖情况,MENK组、NTX组与MENK+NTX组都可以促进淋巴细胞亚群(CTL、NK、γδT)增殖,抑制Treg增殖,与对照组相比具有统计学意义(P<0.05)。结论:MENK在体内外能够抑制胰腺癌细胞增殖,NTX在体内外能够抑制胰腺癌细胞增殖,两者相比MENK作用更加显著;MENK与NTX联合应用,在NTX给药72小时后具有协同作用;NTX在体内能够上调肿瘤组织阿片受体的蛋白表达;MENK和NTX均能在体内能够促进CTL、NK、γδT细胞的增殖,抑制Treg细胞的增殖,二者联合具有协同作用。
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单位中国医科大学附属盛京医院; 中国医科大学
