重组戊型肝炎p179疫苗小鼠抗体间接ELISA检测方法的建立及其初步应用

作者：孟多佳; 于爱东; 韩顺子; 靳萍; 宋昊; 时成波; 迟祥; 唐剑光; 李铮; **峰; 张秀霞; 吴晓娟; 李利

来源：中国生物制品学杂志, 2017, 30(11): 1203-1206.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.002004

• 戊型肝炎疫苗
• p179
• 小鼠
• 间接酶联免疫吸附试验

目的建立重组戊型肝炎p179疫苗抗体间接ELISA检测方法,并进行初步应用。方法确定重组戊型肝炎疫苗p179抗原的最佳包被浓度及包被条件、酶标抗体的最佳稀释度、封闭条件、最佳抗体稀释液,对建立的方法的特异性、准确性及精密度进行验证,并与市售ELISA试剂盒进行比较。结果抗原最佳包被浓度为1μg/ml,4℃包被过夜;酶标抗体最佳稀释度为1∶5 000;3%牛血清白蛋白封闭3 h;最佳抗体稀释液为含1%酪蛋白PBS。建立的方法检测的A450与重组戊肝抗原浓度呈明显的剂量依赖性,对不相关的anti-HAV、anti-HB、anti-INF、anti-RABV无交叉反应;36份小鼠阳性血清的检出率为100%;3份阳性血清重复检测20次的CV均小于15%。市售某厂家ELISA试剂盒检测48份血清,阳性检出率为83.3%,建立的间接ELISA方法检测,阳性检出率为89.6%。结论建立了重组戊肝p179疫苗抗体间接ELISA检测方法,可用于重组戊肝疫苗小鼠免疫后血清抗体的检测。

• 单位
  长春生物制品研究所