多奈哌齐对脑缺血小鼠室管膜下区神经细胞增殖的影响及其Src信号通路机制研究

作者：王建平; 满江; 付晓杰; 张帝; 鲁争芳; 余列; 高宇峰; 刘贤良

来源：中华行为医学与脑科学杂志, 2017, 26(10): 922-926.

• Src
• 室管膜下区
• 脑缺血
• 神经发生
• 小鼠
• 多奈哌齐

目的探讨Src信号通路在室管膜下区(subventricular zone,SVZ)表达胆碱乙酰基转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)的胆碱能神经元促进脑缺血后神经再生中的作用。方法成年雄性昆明小鼠84只,按随机数字表法分为假手术+溶剂组(18只)、脑缺血+溶剂组(22只)、脑缺血+多奈哌齐(胆碱酯酶抑制剂)组(21只)和脑缺血+多奈哌齐+KX2-391(Src阻断剂)组(23只)。用改良神经功能评分(modified neurological severity scores,mNSS)评价神经功能改善情况。采用Ki67标记增殖的细胞,双肾上腺皮质激素(double cortin,DCX)标记神经母细胞,免疫荧光观察各组小鼠SVZ内Ki67+/DCX+细胞的表达。Western blot分析各组小鼠SVZ中Ki67、磷酸化表皮生长因子受体(phospho-epidermal growth factor receptor,p-EGFR)、p-Raf、Src和p-Akt蛋白表达量的变化。结果脑缺血+多奈哌齐+KX2-391组小鼠在各评估时间点mNSS分值较脑缺血+多奈哌齐组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。术后第10天,脑缺血+多奈哌齐组小鼠SVZ中K167+/DCX+细胞数为(125.33±13.71)个/视野,脑缺血+多奈哌齐+KX2-391组细胞数为(71.67±18.35)个/视野,差异有统计学意义(P<0.05)。此外,脑缺血+多奈哌齐组小鼠Ki67、p-EGFR、p-Raf、Src和p-Akt蛋白表达量显著升高,其相应光密度为1.39±0.23,1.42±0.19,0.88±0.13,1.14±0.19,1.04±0.18,脑缺血+多奈哌齐+KX2-391组小鼠Ki67、p-EGFR、p-Raf、Src和p-Akt蛋白表达量显著减少,其相应光密度为0.84±0.26,0.94±0.26,0.73±0.15,0.71±0.18,0.81±0.19(P<0.05)。结论脑缺血后SVZ内ChAT+神经元可能通过Src信使间接上调表皮生长因子受体信号通路,进而促进SVZ神经干细胞增殖。

• 单位
  郑州大学第五附属医院; 神经内科