Trop2过表达对人胃黏膜上皮细胞GES-1迁移能力的影响及机制

作者：饶月丽; 沈定; 陈伟民; 许冬亚; 赵薇; 丁贵鹏; 严杰

来源：南京医科大学学报(自然科学版), 2016, 36(11): 1300-1305.

• Trop2
• GES-1
• 迁移
• 上皮-间质转化

目的 :观察Trop2过表达对人胃黏膜上皮细胞GES-1迁移能力的影响,并对其作用机制进行初步探讨。方法 :realtime PCR和Western blot检测GES-1细胞中Trop2 m RNA和蛋白的表达水平;构建过表达Trop2质粒及空载对照质粒并转染GES-1细胞,检测转染效率;细胞划痕实验和Transwell迁移实验检测过表达Trop2后GES-1细胞迁移能力的变化情况;Western blot检测过表达Trop2后GES-1细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关分子[上皮细胞标志E-钙黏附蛋白(E-cadherin),间皮细胞标志纤维连接蛋白(fibronectin)、波形蛋白(vimentin)]的变化情况。结果:相比胃癌细胞株BGC823和MGC803,Trop2在GES-1细胞中的m RNA和蛋白表达水平均较低;过表达Trop2的质粒转染GES-1后,Trop2的m RNA表达水平与未转染组相比提高(6.18±0.52)倍,而空载对照组和未转染组相比无明显变化,蛋白水平的变化情况和m RNA相似;细胞划痕实验表明,转染72 h后,过表达组细胞迁移率达到95%,空载对照组细胞迁移率为50%,两组相比差异有统计学意义(P﹤0.05);Transwell迁移实验发现,转染24 h后,过表达组穿膜细胞数为(87±6)个,而空载对照组为(41±6)个,两组相比差异有统计学意义(P﹤0.05);Western blot检测过表达Trop2后,随着Trop2蛋白表达量增高,GES-1细胞E-cadherin表达下调,fibronectin和vimentin表达上调。结论 :Trop2过表达可以提高胃黏膜上皮细胞的迁移能力,其机制与Trop2促进胃黏膜上皮细胞EMT有关。

• 单位
  南京医科大学; 浙江大学; 中国人民解放军一一七医院