人外周血单核细胞3种不同转染方法的比较

作者：叶双梅; 阚淳一; 杨丽兰; 杨洁; 马全富; 吴明富; 卢运萍; 王世宣

来源：华中科技大学学报(医学版), 2011, (02): 196-199.

DOI：10.3870/j.issn.1672-0741.2011.02.016

• 外周血
• 单核细胞
• 腺病毒
• 慢病毒
• 基因转染 peripheral blood
• monocytes
• adenovirus
• lentivirus
• gene transfection

目的采用3种不同方法转染原代人外周血单核细胞,以寻找一种简便、高效的单核细胞转染方法。方法采用人淋巴细胞分离液从健康人外周血中分离出单个核细胞,锥虫蓝拒染法检测细胞存活率。单个核细胞在孔板内培养2 h后吸弃悬浮的淋巴细胞,获得贴壁的单核细胞。分别采用Lipofectamine 2000介导载体质粒(PEGF-N1),慢病毒(NC-GFP-LV)及腺病毒(Adv-GFP)3种方法转染单核细胞,48 h后在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)表达情况,并收集细胞上流式细胞仪检测GFP阳性细胞的比例。结果通过人淋巴细胞分离液分离的单个核细胞的活细胞率>95%,获得的单核细胞数量多,贴壁牢,形态均一...

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院