利拉鲁肽对大鼠心肌成纤维细胞调控机制研究

作者：杜优优; 姚瑞; 高路; 孙同文^*

来源：中华急诊医学杂志, 2020, 29(11).

• 利拉鲁肽
• 心肌纤维化
• 心肌成纤维细胞
• 血管紧张素Ⅱ
• 蛋白激酶B

目的探讨利拉鲁肽对心肌成纤维细胞活化增殖和分泌功能的影响。方法分离培养原代大鼠乳鼠心脏成纤维细胞, 采用血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ, AngⅡ)刺激诱导成纤维细胞活化增殖, 采用不同浓度的利拉鲁肽(0、1、50、100、200 nmol/L)处理成纤维细胞。采用CCK8试剂盒检测细胞活性, 采用MTT试剂盒检测细胞增殖, 采用免疫荧光双染检测细胞平滑肌肌动蛋白α(smooth muscle actin α, α-SMA)和Ⅲ型胶原的表达, 采用RT-PCR检测细胞Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、α-SMA和转化生长因子β1(transforming growth factor-β1, TGFβ1)的mRNA表达水平, 采用免疫印迹检测相关蛋白的表达改变。采用SPSS 23.0软件进行分析, 多组样本比较采用单因素方差分析, 事后检验采用LSD-t检验。结果不同浓度的利拉鲁肽处理不影响成纤维细胞活性(F=1.59,P>0.05);AngⅡ组细胞增殖明显增加, 1、50、100、200 nmol/L的利拉鲁肽细胞增殖水平明显低于AngⅡ组(F=231.22, P<0.05);AngⅡ组细胞α-SMA和Ⅲ型胶原的表达明显增加, 100 nmol/L和200 nmol/L利拉鲁肽组细胞α-SMA和Ⅲ型胶原的表达水平明显降低(F=134.45, P<0.05);AngⅡ组细胞Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、α-SMA和TGFβ1的mRNA表达水平高于对照组, 100 nmol/L和200 nmol/L利拉鲁肽组细胞上述因子的mRNA水平明显低于AngⅡ组(F值分别为121.23、143.32、125.43、98.21;均P<0.05);通过免疫印迹检测发现, AngⅡ组细胞中磷酸化的smad2、smad3以及smad4的表达明显高于对照组(F值分别为32.12、42.32、26.54;均P<0.05), 但200 nmol/L利拉鲁肽组细胞中上述因子与AngⅡ组差异无统计学意义;AngⅡ组细胞中磷酸化的蛋白激酶B(AKT)明显高于对照组, 200 nmol/L利拉鲁肽组细胞中磷酸化的AKT明显低于AngⅡ组(F=112.73;P<0.05)。结论利拉鲁肽可以减轻AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞活化、增殖和分泌功能, 主要通过抑制AKT磷酸化机制发挥作用。

• 单位
  郑州大学第一附属医院