人神经系统特异表达RNA结合蛋白HuC cDNA的克隆、表达及纯化

作者：强华; 王先平; 狄文娜; 胡洁淼; 彭小忠; 贾连顺; 阴彬

来源：基础医学与临床, 2006, (06): 608-612.

• RNA结合蛋白HuC
• cDNA克隆
• 原核表达
• 纯化 RNA binding protein HuC
• cDNA cloning
• prokaryotic expression
• purification

目的克隆人神经系统表达RNA结合蛋白HuC的cDNA并原核表达纯化。方法提取人神经母细胞瘤SHSY5Y细胞株总RNA,经RT-PCR扩增得到人HuC全长cDNA的克隆。将HuC cDNA克隆到原核表达载体pGEX4T-3载体中,并转化到大肠杆菌中,在获得高效表达后,利用GST纯化系统,对HuC重组蛋白进行纯化。结果经过表达及纯化条件的摸索,最终获得重组HuC蛋白。结论HuC蛋白是一种神经系统表达RNA结合蛋白,重组HuC蛋白的获得为HuC抗体的制备及进一步研究该蛋白的功能奠定了基础。

• 单位
  长征医院; 医学分子生物学国家重点实验室; 中国人民解放军第二军医大学; 中国协和医科大学; 首都医科大学; 中国医学科学院