HPV58型E2蛋白表达纯化与多克隆抗体制备

作者：姜文婷; 程一航; 唐海平; 谢毅; 连文博; 詹建民; 徐万祥; 顾少华

来源：生殖与避孕, 2015, 35(10): 674-679.

• HPV58型E2蛋白
• 蛋白表达
• 包涵体纯化
• 抗体制备

目的: 表达纯化重组人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)58型E2蛋白, 制备多克隆抗体。方法: 构建重组质粒pET-28b-E2, 转化至BL21(DE3)pLysS中诱导表达, 包涵体洗涤后经镍柱亲和层析分离得到纯化目的蛋白。用纯化的重组E2蛋白免疫新西兰白兔, 制备兔抗HPV58型E2蛋白多克隆抗体, ELISA分析多克隆抗体的效价, 免疫印迹检测抗体的特异性。结果: 表达纯化了重组HPV58型E2蛋白, 制备了高滴度和高特异性的多克隆抗体。结论: 制备的多克隆抗体可用于对HPV58型E2蛋白进行精细B细胞线性表位鉴定。

• 单位
  上海市计划生育科学研究所; 遗传工程国家重点实验室; 复旦大学; 生命科学学院