环丙沙星酶联免疫分析方法的建立

作者：陆宁; 蒲顺昌; 邢爽; 孙玉喜; 丁德杰; 屈业锋; 张志祥; 张慧敏

来源：安徽科技学院学报, 2022, 36(02): 48-54.

DOI：10.19608/j.cnki.1673-8772.2017.1050

• 环丙沙星
• 同源包被
• 间接竞争ELISA

目的:建立检测环丙沙星药物残留的酶联免疫分析方法。方法:采用活泼酯法制备免疫原环丙沙星-牛血清蛋白偶联物、同源包被原环丙沙星-鸡卵清蛋白偶联物、异源包被原氧氟沙星-鸡卵清蛋白偶联物。采用紫外吸收光谱法扫描鉴定人工抗原是否偶联成功。用免疫原免疫新西兰大白兔得到多克隆抗体，对其性能进行鉴定。通过间接竞争酶联免疫分析方法筛选最佳包被原，对抗体和包被原的最佳工作浓度、封闭液浓度等条件进行优化，建立检测环丙沙星的检测方法。最后对方法特异性和准确度进行评价。结果:同源包被比异源包被效果好。当包被原稀释8 000倍，抗体稀释4 000倍时，对环丙沙星的检测灵敏度最高，半抑制浓度IC50为0.16 ng/mL,检测限IC10为0.012 ng/mL。除诺氟沙星外，对其余几种环丙沙星类似物的交叉反应率均在15%以下，鱼肉、禽蛋样品的添加回收率范围为80%～105%。结论:该检测方法对环丙沙星、诺氟沙星具有较强的特异性及较高的灵敏度，可用于水产品、禽蛋中环丙沙星、诺氟沙星的快速检测。

• 单位
  亳州学院