大豆南方茎溃疡病菌PCR检测方法的建立

作者：许忠祥; 杨静; 刘晓宇; 钱茱希; 许剑涛; 李彬^*; 吴翠萍; ***; 吴品珊

来源：植物检疫, 2022, 36(05): 34-40.

DOI：10.19662/j.cnki.issn1005-2755.2022.00.024

• 大豆南方茎溃疡病菌
• 常规PCR
• 实时荧光PCR

大豆南方茎溃疡病是一种世界上危害严重的大豆病害，其病原菌（Diaporthe aspalathi）被列入我国进境植物检疫性有害生物名录。本文基于ITS序列差异设计引物和探针，建立了D. aspalathi常规PCR和荧光PCR检测方法。测试结果表明，常规PCR引物DM-F/DM-R3扩增33个供试菌株，6个D. aspalathi菌株出现394 bp的预期扩增条带，其余供试菌株均无目的条带，检测灵敏度为5 pg菌丝体DNA。探针DM-Pro仅对6个D. aspalathi菌株表现为阳性，其余供试菌株均为阴性，检测灵敏度为500 fg菌丝体DNA。同时，采用这两种方法对进境大豆种子及植株残体等样品进行了验证。以上结果表明，这两种检测方法具有快速、准确、灵敏等优点，可应用于口岸对大豆南方茎溃疡病菌的检疫鉴定及疫情监测。

• 单位
  中国检验检疫科学研究院