高压冷冻及冷冻替代技术在不同生物样品超微结构中的应用

作者：葛灵; 钦风凌; 祁方杰; 涂溢晖; 何钧; 边玮^*

来源：电子显微学报, 2021, 40(01): 61-66.

• 高压冷冻-冷冻替代
• 超微结构
• 睾丸
• Hela细胞
• 酵母

高压冷冻仪在固定样品时,高压和冷冻基本是同步发生的,使得生物样品在数毫秒的时间内被瞬时固定,保证其内部结构接近于生理状态,有效减少了化学固定法中的化学试剂对细胞结构的破坏,极大程度保存了细胞在近似自然状态下的超微结构。本文分别采用化学固定法(CF)和高压冷冻固定法(HPF)对小鼠的睾丸组织、Hela细胞和酵母进行了样品制备,旨在比较这两种方法对不同生物样品超微结构的影响,促进高压冷冻-冷冻替代(HPF-FS)技术在生物学中的应用。透射电镜(TEM)观察结果显示:与传统的化学固定相比,高压冷冻固定可以清晰、完整地保存生物样品的膜结构和亚细胞器结构,细胞形态更加接近自然。

• 单位
  细胞生物学国家重点实验室; 中国科学院