重组人血清白蛋白在CHO细胞中的高效表达及其培养工艺优化

作者：牛宇辉; 李洪珊; 李殿玉; 吴贝; 李向茸^*; 冯若飞^*

来源：中国生物制品学杂志, 2023, 36(09): 1054-1071.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.003991

• 重组人血清白蛋白
• CHO细胞
• 高效表达

目的 在中国仓鼠卵巢（CHO）细胞中高效表达人血清白蛋白（human serum albumin,HSA），并优化其培养工艺，为HSA的规模化生产奠定基础。方法 利用基因重组技术构建HSA的真核表达载体，并将其电转染至全悬浮CHO细胞中，利用G418及有限稀释法筛选获得可稳定高表达HSA的单克隆细胞株，通过在基础培养基中添加葡萄糖、丁酸钠及补料培养基等方式进行细胞培养工艺优化，以提高HSA表达量；最终在5 L生物反应器上进行放大培养验证。结果 成功构建了重组表达质粒pcDNA3.1-HSA，并在全悬浮CHO细胞中实现分泌表达后，又经过2次单克隆筛选，获得高表达HSA的2次单克隆细胞株CHO-rHSA-7H2A9和CHO-rHSA-7H2D12，表达量分别达到29.37和25.26 mg/L；通过培养工艺优化使HSA表达量达到100.00 mg/L左右；最终使5 L生物反应器上HSA表达量提升至166.16 mg/L，与第1次单克隆细胞上清中HSA表达量相比，提高了30倍左右。结论 实现了HSA在CHO细胞中的高效表达，为进一步在生物制品领域规模化生产HSA及解决市场供应问题奠定了基础。

• 单位
  西北民族大学