TLR3活化对人脂肪间充质干细胞成骨分化的影响

作者：金兵男; 江鑫铭; 李霄霞^*; 赵春华^*

来源：青岛大学学报(医学版), 2021, 57(04): 475-480.

• 间质干细胞
• 脂肪组织
• Toll样受体3
• 成骨分化

目的探讨Poly(I:C)活化人脂肪间充质干细胞(hAMSCs)Toll样受体3(TLR3)后对hAMSCs成骨分化的影响。方法胶原酶消化法分离提取hAMSCs,对其细胞形态、免疫学表型和成骨分化能力进行鉴定。将原代分离培养的hAMSCs随机分为对照组和TLR3组,对照组不做处理,TLR3组用含有20 mg/L Poly(I:C)的正常培养基处理6 h活化TLR3。CCK8法检测两组hAMSCs增殖能力变化,Real-time PCR方法检测hAMSCs成骨标志基因runt相关转录因子2(RUNX2)和骨钙素(OCN)mRNA表达,Western Blot方法检测RUNX2和OCN蛋白及NF-κB通路相关蛋白p-P65、P65表达。对照组和TLR3组均用间充质干细胞成骨诱导培养基诱导分化,12 d后用茜素红染色法检测两组hAMSCs成骨诱导后钙质沉积情况。结果对照组和TLR3组hAMSCs的增殖能力差异无显著性(P>0.05)。TLR3组hAMSCs成骨标志基因RUNX2及OCN的mRNA和蛋白表达均高于对照组(t=2.98～36.36,P<0.05),NF-κB通路相关蛋白P65及p-P65表达也高于对照组(t=3.52、13.85,P<0.05)。茜素红染色结果显示,成骨诱导12 d后TLR3组钙质沉积程度高于对照组。结论 TLR3活化能够通过激活NF-κB通路促进hAMSCs成骨分化。

• 单位
  基础医学院; 青岛大学