激素处理下马尾松茎干组织q PCR内参基因的筛选

作者：覃慧娟; 范付华^*; 周紫晶

来源：农业生物技术学报, 2022, 30(02): 393-401.

• 马尾松
• 内参基因
• 激素处理
• qPCR

马尾松(Pinus massoniana)的利用价值极高,施加外源激素可促进其茎干的次生生长和木材形成,快速提高生长速度。筛选激素处理下马尾松茎干qPCR实验的最佳内参基因,可为马尾松次生生长的基因表达研究提供技术支持。本研究从马尾松茎干转录组数据库选取14个候选内参基因,利用qPCR技术进行基因表达分析,采用GeNorm、NormFinder和BestKeeper三款软件分析候选内参基因在不同激素—生长素(auxin, IAA)、赤霉素(gibberellin, GA3)和油菜素内酯(brassinolide, BR)处理条件下马尾松茎干中的表达稳定性,并借助目的基因—纤维素合成酶2 (cellulose synthase 2, CESA2)对筛选出的内参基因进行验证。结果显示,在不同激素处理下,表达稳定性最佳的内参基因为磷酸胆碱胞二苷酰基转移酶1基因(phosphoate cytidine transferase 1, PCYT1)、泛素结合酶E2D基因(ubiquitin-conjugating enzyme E2D,UBE2D)和磷酸葡萄糖变位酶基因(phosphoglucomutase, PGM);目的基因CESA2在激素处理下的表达模式证实上述内参基因组合具有良好的可靠性。本研究筛选的内参基因有助于提高马尾松qPCR实验的准确性和可靠性,为在激素处理下的马尾松基因表达分析提供技术支持。

• 单位
  贵州大学