副溶血弧菌VPA1405多克隆抗体制备及应用

作者：闫小娟; 张义全; 王丽; 刘梦颖; 杨世亚; 杨瑞馥; 周冬生; 邱景富

来源：军事医学, 2013, 37(02): 118-121+125.

• 副溶血弧菌
• 生物膜
• Western印迹

目的建立副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)的Western印迹方法。方法将VPA1405基因克隆到pET-28a(+)载体,转入大肠杆菌BL21中进行不可溶性表达,在变性条件下纯化得到VPA1405蛋白,制备的包涵体溶液直接免疫兔得到多克隆抗体,进而利用Western印迹检测VPA1405蛋白在野生株(WT)和opaR基因敲除株(ΔopaR)中表达水平的差异。结果成功表达纯化了6个与生物膜相关基因的蛋白;Western印迹结果显示OpaR调控子对VPA1405基因的表达呈正调控,这与表型实验结果相符。结论成功建立了VP的Western印迹实验平台,该平台可用于后续VP生物膜相关基因的调控研究。

• 单位
  军事医学科学院; 重庆医科大学; 病原微生物生物安全国家重点实验室