一种简单、快速的苏云金芽胞杆菌基因组DNA提取方法

作者：张彦蕊; 束长龙; 宋福平; 黄大昉; 张杰

来源：生物技术通报, 2012, (11): 197-201.

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2012.11.025

• 苏云金芽胞杆菌
• 基因组DNA
• 提取
• 纯度
• PCR
• 酶切 Bacillus thuringiensis Genomic DNA Extraction Purification PCR Enzyme digestion

从培养时间、裂解溶液、抽提和沉淀时间等方面对苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)基因组DNA提取技术进行改进。提取8株对蛴螬有杀虫活性的野生Bt菌株的基因组DNA,分析其纯度,并进行PCR分析与酶切分析。试验结果表明,新的提取方法耗时36 min,明显短于旧方法所用时间(97 min);两种方法提取的基因组DNA A260/A280均大于1.8,无明显区别;琼脂糖凝胶电泳结果显示,上样量相同时,新方法提取的基因组DNA浓度是旧方法的5倍以上;新方法提取的基因组DNA能作为模板灵敏地扩增出测试基因,所提取的DNA能被限制性内切酶完全酶切,证明DNA具有很高的纯度。...

• 单位
  植物病虫害生物学国家重点实验室; 中国农业科学院生物技术研究所; 中国农业科学院植物保护研究所