布鲁菌分泌蛋白BspG多克隆抗体的制备

作者：马忠臣; 张超; 李芮芮; **; 王勇^*; 陈创夫^*

来源：动物医学进展, 2020, 41(10): 47-52.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2020.10.009

• 布鲁菌
• BspG分泌蛋白
• 生物信息学分析
• 原核表达
• 多克隆抗体

为了获得一定纯度及浓度的布鲁菌分泌蛋白BspG,制备其多克隆抗体。首先通过生物信息学方法分析预测BspG蛋白序列特征及功能域;采用原核表达的方式获得BspG蛋白,纯化好的BspG蛋白混入弗氏佐剂后分4次免疫试验兔制备多克隆抗体; Western blot鉴定BspG蛋白免疫原性,方阵滴定法确定间接ELISA最佳抗原抗体工作浓度,进而评定BspG蛋白多克隆抗体效价。生物信息学方法分析出BspG蛋白含有7个抗原决定簇及多种B细胞抗原表位;成功纯化出BspG蛋白并制备出BspG蛋白多克隆抗体。Western blot验证BspG于HEK293T细胞中的表达,间接ELISA测定BspG多克隆抗体效价为1∶3 276 800。原核表达获得布鲁菌BspG蛋白并制备出其多克隆抗体,为BspG后续的研究奠定了基础。

• 单位
  石河子大学; 动物科技学院