肿瘤睾丸抗原OY-TES-1氨基端截短蛋白及其多克隆抗体的制备

作者：陈玉升; 韦连登; 范蓉; 罗彬; 何少健; 林永达; 陈芳; 谢小薰; 肖绍文

来源：免疫学杂志, 2011, (03): 254-258.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20110060

• OY-TES-1
• 融合蛋白
• 克隆
• 纯化
• 多克隆抗体 OY-TES-1
• Fusion protein
• Gene cloning
• Purification
• Polyclonal antibody

目的获得原核表达的OY-TES-1氨基端截短蛋白(OY-TES-1-N),并制备其多克隆抗体。方法扩增编码OY-TES-1-N 268个氨基酸(A6-R273)的cDNA序列;将PCR产物插入原核表达载体pMAL-C2,构建重组质粒,并转化DH5α菌;通过蓝白斑筛选、DNA测序筛出阳性菌;在优化条件下用IPTG对阳性菌进行诱导表达MBP/OY-TES-1-N融合蛋白;上Amyloseresin亲和层析柱纯化,行Western blot鉴定。以融合蛋白作为抗原免疫新西兰白兔制备抗血清,经活化琼脂糖微球纯化后,采用ELISA法及Western blot法分别检测抗血清的效价和多克隆抗体的特异性。结...

• 单位
  广西中医药大学; 广西医科大学; 广西医科大学第一附属医院