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摘要
本发明公开了一种环境中抗生素抗性基因的定量检测试剂盒及其定量检测方法。该试剂盒包括以下成分：Solution I、Solution II、Solution III、ddH2O和ROX。所述检测方法主要步骤为：1)以环境样品的DNA为模板,将其与Solution I和Solution II加入八联排管中,并根据qPCR仪型号确定是否加入ROX,最后添加ddH2O；2)将标准质粒Solution III(与Solution I对应)按10倍梯度稀释,随后将不同梯度的标准质粒Solution III分别与Solution I和Solution II加入八联排管中,ddH2O和ROX加入方法与步骤1)相同；3)将步骤1)和2)中的样品同时进行荧光定量PCR扩增,最终得出抗性基因标准曲线和基因丰度。本发明的试剂盒可以快速高效地定量分析环境中抗生素抗性基因的丰度,不仅特异性好,精确度高,而且能大大缩短实验周期,提高实验操作效率。
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单位华东师范大学; 上海众择生物科技有限公司
