雌激素相关受体α调节剂细胞筛选模型的建立及应用

作者：李群益; 陈莉; 杜永丽; 张留弟; 钟明康; 施孝金

来源：中国新药杂志, 2015, 24(03): 351-356.

• 雌激素相关受体α
• 反向激动剂
• 肿瘤
• 增殖

目的:建立一种筛选评价雌激素相关受体α(estrogen-related receptorα,ERRα)调节剂的细胞模型,并用于计算机辅助设计、人工合成的化合物样品的评价。方法:用p CMV-h ERRα,3×ERRE-Luc及pRL-TK共同转染人胚肾细胞HEK-293,加入阳性药XCT790或筛选化合物孵育,分别检测HEK-293中萤火虫荧光素酶及海肾荧光素酶的活性,建立基于受体-应答元件的ERRα调节剂细胞筛选模型,用Z’因子评价本模型的稳定性,并测试了83个化合物对ERRα转录调节活性。用CCK-8检测DLE2-24对乳腺癌细胞MCF-7的增殖抑制效应,用RT-PCR考察DLE2-24对MCF-7中ERRα靶基因SOD2及VEGF的mRNA水平的影响。结果:成功建立ERRα-ERRE-Luc基因瞬时共转染模型,阳性药XCT790的IC50为0.24μmol·L-1,Z’因子为0.68,信号/本底为20.7。应用本模型筛选出15个ERRα反向调节剂。其中,DLE2-24剂量依赖性地抑制MCF-7的增殖,显著下调了ERRα下游靶基因SOD2及VEGF的mRNA水平。结论:本研究成功建立了一种高效、可靠的ERRα调节剂细胞筛选模型,适用于ERRα调节剂的发现与评价。

• 单位
  上海市徐汇区中心医院; 复旦大学附属华山医院; 齐鲁工业大学