中国明对虾过氧化物还原酶基因在大肠杆菌中的重组表达、产物纯化及活性测定

作者：张庆利; 李富花; 张继泉; 蒋昊; 相建海

来源：中国生物工程杂志, 2008, 28(02): 47-52.

DOI：10.3969/j.issn.1671-8135.2008.02.009

• 中国明对虾
• 过氧化物还原酶
• 重组表达
• 纯化
• 活性 Fenneropenaeus chinensis Peroxiredoxin Expression Purification Activity analysis

采用RT-PCR扩增编码中国明对虾Prx成熟肽的基因,并克隆到大肠杆菌表达载体pCRT7/NT TOPO TA中进行体外重组表达。重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS后,经IPTG诱导表达产生包涵体形式的目的蛋白。对重组蛋白进行LC-ESI-MS分析,结果表明融合蛋白的4个肽段与中国明对虾Prx相应肽段完全一致。将重组蛋白通过金属螯合柱进行纯化,进而透析、复性,最后获得了具有较高过氧化物酶活性的重组Prx。

• 单位
  中国科学院海洋研究所; 中国科学院研究生院