两种端粒酶逆转录酶启动子真核表达载体的构建

作者：刘华; 马春红; 刘素侠; 王晓燕; 高立芬; 韩丽辉; 朱法良; 张艳; 杨咏梅; 吴伟芳

来源：中国现代普通外科进展, 2005, (04): 212-215.

DOI：10.3969/j.issn.1009-9905.2005.04.008

• 端粒酶逆转录酶·启动子·基因表达·基因融合·肝炎病毒
• 乙型

目的:构建hTERT启动子和保留HBV同源序列的缺失点变hTERT启动子(pGL3del445)的真核表达载体,为进一步研究HBV与hTERT启动子的关系奠定实验基础。方法:通过双酶切及PCR方法从pCRTRTP载体上将全长及含有HBV同源序列的hTERT启动子的基因序列克隆到pPLbasic多克隆位点上,构建真核表达载体pGL3TRTP与pGL3Bdel445,将该两质粒与pRLtk共转染不同细胞系,评估其端粒酶启动子活性。结果:经测序证明成功构建了全长及含有HBV同源序列的hTERT启动子的真核表达载体pGL3TRTP和pGL3Bdel445,共转染实验中,证实在永生细胞系中重组子高效表达,在非永生正常细胞中重组子不表达。结论:构建的两种重组表达载体具有端粒酶启动子活性,在不同端粒酶表型的细胞系中其表达具有选择性。

• 单位
  山东大学