乙型肝炎病毒X蛋白通过降低P4启动子甲基化水平上调人IGF-Ⅱ基因的转录

作者：汤绍辉; 张良鹏; 吴小娟; 张嫚嫚; 王旷靖; 周鸿科; 罗羽宏; 曹明溶

来源：中国病理生理杂志, 2012, (09): 1633-1638.

• 乙型肝炎病毒X蛋白
• 胰岛素样生长因子Ⅱ
• 启动子
• DNA甲基化 Hepatitis B virus X protein
• Insulin-like growth factor Ⅱ
• Promoters
• DNA methylation

目的:构建稳定表达乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)的肝癌细胞株HepG2-HBx,探讨HBx对胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)基因P4启动子甲基化水平及转录表达的影响。方法:应用基因重组技术,构建含HBx基因的重组逆转录病毒载体pBABE-puro-HBx,采用磷酸钙共沉淀法将其转染293FT包装细胞产生逆转录病毒,感染HepG2肝癌细胞,采用嘌呤霉素进行阳性克隆筛选,Western blotting鉴定表达HBx蛋白的肝癌细胞株HepG2-HBx。采用亚硫酸氢盐测序法及实时荧光定量RT-PCR检测HepG2-HBx细胞中P4启动子甲基化水平及P4mRNA表达水平变化。进一步将体外甲基化的人IGF...

• 单位
  暨南大学附属第一医院