白细胞介素-17A在原发性干燥综合征发病中的作用探讨

作者：马熙; 黄芳琴; 黄钊伟; 曾苹; 马武开^*

来源：中华风湿病学杂志, 2023, 27(10).

• 干燥综合征
• CD4+T细胞
• 白细胞介素-17
• 自噬

目的探讨IL-17A对pSS患者炎性因子和PBMCs自噬基因的调控作用。方法选择符合pSS诊断的患者30例, 抽取20 ml外周血, 分离PBMCs, 分为PBMCs组、IL-17A刺激剂组和IL-17A抑制剂组, 温育48 h后, 应用免疫荧光检测微管相关蛋白l轻链3(LC3)自噬小体, ELISA法检测炎性因子IL-4、IFN-γ、IL-13的表达, 实时荧光聚合酶链反应(qRT-PCR)检测自噬诱导基因Ambra-1、Bif-1和凋亡基因Bcl-2、Bcl-XL mRNA的表达, 免疫蛋白印迹法检测苄氯素1(Beclin1)和LC3蛋白表达。采用方差分析比较组间差异, 两两比较采用t检验。结果免疫荧光结果显示, 与IL-17A刺激剂组比较, IL-17A抑制组LC3自噬小体明显增多。ELISA结果显示, 与PBMCs组[IL-4分泌量(13.39±0.32)pg/ml, IFN-γ分泌量(14.4±0.4)pg/ml, IL-13分泌量(854±36)pg/ml]比较, IL-17A刺激组IL-4分泌量(11.54±0.30)下降(t=12.83, P=0.024), IFN-γ和IL-13分泌量[(17.6±0.4)pg/ml, (908±51)pg/ml]增加(t=19.35, P=0.033;t=2.55, P=0.020);与IL-17A抑制剂组[IL-4分泌量(15.65±0.26)pg/ml, IFN-γ分泌量(13.6±0.3)pg/ml, IL-13分泌量(792±57)pg/ml]比较, IL-17A刺激剂组IL-4分泌量降低(t=21.31, P=0.006), IFN-γ和IL-13分泌量增加(t=17.34, P=0.015;t=5.14, P=0.007)。PCR结果显示:与PBMCs组Ambra-1, Bif-1, Bcl-2, Bcl-XL mRNA表达量(5.61±0.33, 5.04±0.60, 1.28±0.09, 1.56±0.03)比较, IL-17A刺激组Ambra-1、Bif-1 mRNA表达量(3.76±0.24, 4.68±0.41)下调(t=14.30, P=0.007;t=15.02, P=0.012), IL-17A抑制组Ambra-1、Bif-1 mRNA表达量(7.91±1.17, 9.30±0.25)增加(t=13.59, P=0.025;t=11.54, P=0.031), IL-17A刺激组抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-XL mRNA表达量(1.75±0.06, 2.43±0.16)上调(t=19.92, P=0.006;t=21.04, P=0.007), IL-17A抑制组Bcl-2、Bcl-XL mRNA表达量(0.48±0.03, 0.83±0.10)下调(t=29.44, P=0.027;t=16.31, P=0.023)。蛋白印迹法结果显示, 与PBMCs组Beclin-1, LC3蛋白表达(0.72±0.09, 0.635±0.017)比较, IL-17A刺激组BecLin-1和LC3蛋白表达(0.51±0.10, 0.559±0.1010)下降(t=14.38, P=0.034;t=17.99, P=0.014);IL-17A抑制组Beclin-1和LC3蛋白表达量(0.83±0.11, 0.737±0.025)增加(t=9.72, P=0.027;t=22.35, P=0.007)。结论 IL-17A通过调控炎症因子IL-4、IFN-γ、IL-13及自噬相关基因Beclin-1、LC3等表达在pSS中发挥作用。

• 单位
  贵州中医药大学