牛流行热病毒糖蛋白G_1抗原表位在毕赤酵母中的表达和抗原性鉴定

作者：郑福英; 蔺国珍; 邱昌庆; 原魁章; 宋军英

来源：微生物学通报, 2007, (05): 843-847.

DOI：10.13344/j.microbiol.china.2007.05.026

• 牛流行热病毒
• G1抗原表位
• 毕赤酵母
• 表达
• 鉴定 Bovine ephemeral fever virus
• Epitope-G_1
• Pichia pastoris
• Expression
• Characterization

从包含牛流行热病毒G蛋白基因的质粒pMD-G中克隆G1抗原表位区基因,亚克隆进表达载体pPIC9K,构建重组载体pPIC9K-G1,线性化后电转化毕赤酵母GS115,通过G418压力和PCR法筛选阳性重组酵母进行诱导表达。经SDS-PAGE、脱糖基化分析、Western blot、ELISA、兔体免疫实验和特异性分析,表明该基因在GS115中表达并进行了适度的糖基化,表达蛋白有良好的生物学活性和特异性,可作为包被抗原,开发ELISA诊断试剂盒。