摘要

目的探讨血管内皮细胞中铁调素(HAMP)变化对成骨细胞的影响及其作用机制。方法设计铁调素敲降和过表达的慢病毒, 对血管内皮细胞进行转染72 h。实验组分为4组:血管内皮细胞分为铁调素过表达组(HAMP+组)及其对照组(Cont+组), 铁调素敲降组(HAMP-组)和其对照组(Cont-组)。间接共培养的成骨细胞分组同血管内皮细胞分组。蛋白质印迹法(Western blot)检测血管内皮细胞铁调素蛋白(HAMP)、外泌体表面标记蛋白肿瘤易感基因101蛋白(TSG101)和CD63、成骨细胞蛋白碱性磷酸酶(ALP), 骨钙蛋白(OCN), RUNT相关转录因子2(RUNX2), 荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测成骨相关基因的转录组表达。组间比较采用t检验分析。结果检测转染的血管内皮细胞中, HAMP+组铁调素蛋白表达(1.21±0.02, t=5.80, P<0.05)高于对照Cont+组。HAMP-组铁调素HAMP-组蛋白表达(0.76±0.02, t=6.56, P<0.05)低于对照Cont-组。共培养后成骨细胞成骨蛋白ALP、OCN、RUNX2表达, 在HAMP+组成骨细胞中(1.07±0.01、1.61±0.03、1.94±0.01, t=313.40、184.30、309.50, P<0.05)高于Cont+组;在HAMP-组中蛋白表达低于对照Cont-组(0.70±0.05、0.74±0.01、0.75±0.01, t=3.52、15.90、17.67, P<0.05)。结论血管内皮细胞内铁调素表达量改变会对成骨细胞产生影响, 机制可由"铁调素-血管内皮细胞-成骨细胞"途径驱动, 提示了铁调素对骨代谢的重要作用。

  • 单位
    苏州大学附属第二医院