左金丸联合西妥昔单抗诱导KRAS突变肠癌细胞铁死亡作用研究

作者：卫真真; 隋华; 姜宇朗; 孙明瑜; 闫化茹; 王子元^*

来源：中国临床药理学与治疗学, 2023, 28(02): 130-137.

• 结直肠癌
• 西妥昔单抗
• KRAS突变
• 铁死亡
• 左金丸

目的:探讨左金丸(ZJW)对KRAS突变的人结肠癌细胞西妥昔单抗(CET)抵抗的效果及机制。方法:采用Sanger测序法检测SW620、Lovo、HCT116、HT29和Caco2细胞KRAS基因突变状态；采用CCK-8法检测ZJW、CET、ZJW联合CET以及联合不同细胞死亡抑制剂对上述细胞存活率的影响，并观察ZJW联合CET对KRAS突变型细胞(SW620、Lovo及HCT116)耐药性的影响；流式细胞术、比色法和FerroOrange荧光探针检测和观察ZJW、CET以及它们联合作用对KRAS突变型细胞内ROS、GSH及Fe2+水平的影响；Western blot和Real-time PCR法检测ZJW联合CET对铁死亡相关通路蛋白和mRNA的调控作用。结果:KRAS突变型细胞为HCT116(KRASG13D),Lovo(KRASG13D),SW620(KRASG12V),KRAS野生型细胞为HT29和Caco2;与125μg/mL CET处理组比较，相同浓度CET明显降低KRAS野生型细胞Caco2和HT29的存活率，分别为34.03%和40.68%(P<0.01);与空白对照组比较，ZJW(50μg/mL)联合CET(125μg/mL)后，HCT116、Lovo和SW620细胞存活率均有显著下降，分别为59.97%,59.47%,52.58%(P<0.05);ZJW能够增强KRAS突变细胞内ROS和Fe2+水平，降低GSH水平；当ZJW联合CET后，效果更加显著(P<0.05,P<0.01)。ZJW联合CET抑制SW620细胞SLC7A11、GPX4、Nrf2、MDM2蛋白和mRNA的表达，增强p53蛋白的表达，但不影响p53 mRNA的水平。结论:ZJW能够调控KRAS突变细胞Nrf2和p53途径从而抑制SLC7A11和GPX4促进铁死亡，可能是逆转CET耐药的机制。

• 单位
  上海市第一人民医院; 上海中医药大学附属曙光医院