新生隐球菌COP9复合体基因CSN6的敲除与鉴定

作者：杨雅骊; 张超; 孟云芳; 法振宗; 周兆婧; 赵静宇; 方伟; 廖万清

来源：中国真菌学杂志, 2014, 9(06): 321-330.

• 新生隐球菌
• COP9信号复合体
• CSN6
• 致病机制

目的构建新生隐球菌COP9复合体蛋白元件Csn6的基因同源重组敲除框,并通过基因枪转化系统敲除CSN6基因。方法应用生物信息学方法获得COP9复合体蛋白元件的基因信息,采用套叠PCR的方法,构建包含报告基因NEO和CSN6基因ORF两侧上下游同源DNA片段的同源重组框。应用基因枪将其转化入新生隐球菌感受态细胞,通过PCR和DNA测序对遗传霉素(G418)耐受的阳性克隆子进行筛选与验证。结果成功构建了新生隐球菌基因突变株csn6裣。结论 COP9复合体亚基CSN6基因突变株的构建,为今后新生隐球菌COP9复合体的分子致病机制研究奠定基础。

• 单位
  长征医院; 中国人民解放军第二军医大学; 上海长征医院