非洲猪瘟病毒p30蛋白卵黄抗体的制备及生物活性检测

作者：张皓淳

来源：国外畜牧学.猪与禽, 2022, 42(01): 32-36.

• 非洲猪瘟病毒
• 抗原蛋白
• 卵黄抗体
• 生物活性
• IgY

为了制备非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)p30蛋白卵黄抗体，研究卵黄抗体的生物活性。试验构建了p ET-32a-p30原核表达载体，制定了科学的免疫程序和样本采集方法。提取卵黄液，进行二次盐析，得到对应的卵黄抗体。用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA)测定卵黄抗体效价，用免疫印迹（Westernblotting）技术对其生物活性进行鉴定。ELISA试验表明：首次免疫p30蛋白7d后，能够在蛋鸡的血清中检测出抗体（Ig Y）,14d后在卵黄中能够提取到Ig Y,35d后Ig Y效价达到最高值。IgY具备和哺乳动物产生的IgY不同的生物活性，并可具有较高的特异性和稳定性，在免疫学研究中具有重要的价值。利用Ig Y进行实验检测，具有突出优势。通过抗原即ASFV p30蛋白免疫蛋鸡，分离提纯免疫蛋白，检测其生物活性，可用于鉴定非洲猪瘟。