抗H7N9流感病毒神经氨酸酶嵌合抗体的制备及初步鉴定

作者:阮菲儿; 陈玲玲; 秦堃; 刘明斌; 陈海婴; 周剑芳*
来源:中华实验和临床病毒学杂志, 2019, (02): 212-216.

摘要

目的 制备抗H7N9神经氨酸酶(neuraminidase,NA)的嵌合抗体,初步鉴定其活性与功能特点。方法 采用基因工程技术,将小鼠杂交瘤技术获得的2株特异性靶向流感病毒A/Anhui/1/2013(H7N9) NA的单克隆抗体VH、VL基因分别克隆入嵌合抗体表达载体VH Express及VL Express中,共转染293T细胞后,表达纯化获得抗H7N9 NA的嵌合抗体,对抗体活性及功能进行鉴定。结果 获得了两株特异性抗H7N9亚型流感病毒N9嵌合抗体1E2和3E3,这两株抗体识别抗原部位相似,能抑制NA酶活性及耐药N9神经氨酸酶活性,体外细胞实验中能抑制病毒释放,阻止病毒进一步感染细胞。结论 本研究构建的两株嵌合抗体能特异性识别A/Anhui/1/2013(H7N9)的N9蛋白,KD值达pM,并能抑制N9酶活性,为流感抗体制备以及HAPI禽流感治疗提供了一种可选择的方法。