西尼罗病毒NS1与E基因重组腺病毒的构建及免疫原性研究

作者：刘二战; 赵国辉; 孙恩成; 崔焕忠; 杨涛; 徐青元; 孙晶; 孙亮; 席娜; 魏天; 吴东来

来源：中国预防兽医学报, 2014, 36(11): 881-884.

• 西尼罗病毒
• NS1
• E
• 重组腺病毒
• 体液免疫

为构建串联表达西尼罗病毒(WNV)NS1和E基因的重组腺病毒,本研究利用口蹄疫病毒具有自我切割功能的2A蛋白的编码序列将NS1和E基因串联,构建穿梭载体p Shuttle-WNV-NS1-2A-E,通过细菌内同源重组获得重组腺病毒DNA,经脂质体转染AD293细胞,在细胞内完成病毒粒子的组装制备重组腺病毒。通过间接免疫荧光和western blot检测表明:重组腺病毒中的外源基因表达的融合蛋白NS1-2A-E可以自我裂解为NS1和E蛋白。将构建的重组腺病毒免疫小鼠,结果表明该重组病毒可以诱导机体产生良好的体液免疫应答。本实验为WNV重组腺病毒活载体疫苗的研制奠定了基础。

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 吉林农业大学; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 农业部