慢病毒载体介导的小鼠骨髓树突状细胞RelB基因沉默

作者：包杰; 王前; 郑磊; 裘宇容; 曾方银; 杨春莉; 黄**

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2008, 24(09): 857-860.

DOI：10.3321/j.issn:1007-8738.2008.09.004

• 慢病毒载体
• 树突状细胞
• RelB基因
• 基因沉默

目的:利用慢病毒载体沉默小鼠骨髓树突状细胞(DC)的RelB基因,建立RelB基因低表达的骨髓致耐受DC,为自身免疫病的防治提供新方法。方法:设计小鼠RelB基因干扰的靶序列R5,合成并克隆到慢病毒载体上,与慢病毒的包装材料在293FT细胞中包装成病毒颗粒,收集病毒上清,测定病毒滴度,然后包装慢病毒感染DC,RT-PCR和免疫荧光方法检测,灰度扫描并用软件分析RelB基因的表达水平,未成熟DC作对照组,选择T6包装病毒为RNAi的阴性对照。结果:RT-PCR和免疫荧光方法发现R5病毒感染的DCRelB基因表达水平与未成熟DC基因表达水平接近,低于成熟DC的表达水平(P<0.05),而实验对照T6组病毒感染的DC其RelB基因表达水平高于未成熟DC(P<0.05)和R5病毒转染DC组(P<0.05)。结论:小鼠骨髓DC表达的RelB基因被慢病毒载体有效沉默,有望成为DC免疫治疗的新载体。

• 单位
  南方医科大学南方医院; 广东省中医院