蛋白激酶C-α信号通路在尼古丁诱导的脐静脉内皮细胞PAI-1表达中的作用

作者：吕茹; 裴硕; 樊芳芳; 张潍; 冉博文; 胡晓芸^*

来源：中西医结合心脑血管病杂志, 2021, 19(18): 3113-3117.

• 人脐静脉内皮细胞
• 蛋白激酶C-α
• 尼古丁
• 纤溶酶原激活物抑制物-1

目的探讨蛋白激酶C-α(PKC-α)信号通路在尼古丁诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)表达中的作用。方法体外培养HUVECs,随机分为4组:对照组、尼古丁组、STS组及尼古丁+STS组。收集各组细胞及上清液,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定上清液PAI-1蛋白含量,细胞逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞PAI-1 mRNA表达,免疫荧光染色观察PKC-α在细胞内的定位变化,蛋白免疫印迹(Western Blot)法测定细胞胞浆与胞膜PKC-α的表达水平。结果尼古丁组PAI-1蛋白及mRNA表达水平较对照组升高,差异均有统计学意义(P均<0.01);尼古丁+STS组PAI-1蛋白及mRNA表达水平较尼古丁组下降,但仍高于对照组,差异均有统计学意义(P均<0.01)。对照组HUVECs中PKC-α的绿色荧光均匀分布于细胞浆中;尼古丁孵育后胞内PKC-α发生移位,在细胞膜出现明显的绿色荧光;STS处理组胞浆的绿色荧光减弱;尼古丁+STS组细胞膜荧光强度低于尼古丁组。尼古丁组胞膜PKC-α蛋白增高,胞浆PKC-α蛋白降低,胞膜/胞浆PKC-α蛋白表达增高,与对照组比较差异均有统计学意义(P均<0.01)。尼古丁+STS组胞膜PKC-α蛋白较尼古丁组降低,胞浆PKC-α蛋白较尼古丁组升高,胞膜/胞浆PKC-α蛋白较尼古丁组降低,差异均有统计学意义(P均<0.01)。胞膜PKC-α表达与PAI-1 mRNA及蛋白表达呈正相关(r值分别为0.813、0.882,P均<0.05);胞浆PKC-α蛋白与PAI-1 mRNA及蛋白表达呈负相关(r值分别为-0.744、-0.797,P均<0.05)。结论在尼古丁诱导HUVECs上调PAI-1表达过程中,伴随着细胞内PKC-α蛋白膜转位及表达变化,PKC-α信号通路参与内皮细胞纤溶紊乱。

• 单位
  山西医科大学第一医院