试剂盒法与差速超速离心法所提取的人牙髓细胞外泌体的鉴定与比较

作者：郑程峰; 陈硕琳; 陈文瑨; 林万惠; 吴周玲; 韦慧妮; 陈文霞^*

来源：广西医科大学学报, 2019, 36(04): 538-542.

DOI：10.16190/j.cnki.45-1211/r.2019.04.010

• 人牙髓细胞
• 外泌体
• 试剂盒法
• 差速超速离心法

目的:采用试剂盒法以及差速超速离心法提取的人牙髓细胞外泌体(hDPC-DEs),并进行鉴定与比较。方法:培养原代人牙髓细胞(hDPCs)并鉴定,收集hDPCs培养上清,分别采用试剂盒法和差速超速离心法提取hDPC-DEs,在透射电镜下进行形态学观察,利用免疫印记(Western blotting)法对外泌体表面标记蛋白CD9的表达进行检测,并通过酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定外泌体表面标记蛋白CD63的浓度。结果:透射电镜下试剂盒法与差速超速离心法所提hDPC-DEs均表现为典型的茶托状双层膜结构,直径在50～120nm,试剂盒组背景杂质较多,差速离心组背景较为清晰。两种方法提取的hDPCDEs特异性标志蛋白CD9均呈阳性表达。试剂盒组外泌体标志蛋白CD63的浓度高于差速超速离心组(P<0.05)。结论:试剂盒法与差速超速离心法均可获得hDPC-DEs,前者操作简便,所提取的hDPC-DEs的浓度较高,但杂质可能比较多。

• 单位
  广西医科大学附属口腔医院