Hsacirc0016600/miR-1298/TGFA轴促进人肺腺癌细胞增殖和迁移的作用机制

作者：曹碧月; 王慧敏; 王亚东; 邹晓莉; 王雪君; 严玉兰^*

来源：医学研究生学报, 2022, 35(09): 950-958.

DOI：10.16571/j.cnki.1008-8199.2022.09.010

• Hsa＿circ＿0016600
• miR-1298
• TGFA
• 肺腺癌

目的 目前对于Hsa＿circ＿0016600是否通过miR-1298/TGFA轴通路参与肺腺癌的发生过程尚不清楚。文中旨在探讨Hsa＿circ＿0016600对肺腺癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其对miR-1298/TGFA通路的调控作用。方法 通过高通量测序技术对5对肺癌组织及癌旁组织进行检测，筛选出具差异性的环状RNA Hsa＿circ＿0016600,利用mirTarbase和TargetScan数据库预测、荧光素报告酶实验验证Hsa＿circ＿0016600与miR-1298、miR-1298与TGFA的相互作用；利用qRT-PCR技术检测Hsa＿circ＿0016600在肺腺癌组织及细胞系中的表达情况。根据转染肺腺癌细胞不同分为：Si-NC组(Si-NC转染肺腺癌细胞)、Si-circ组(Si-hsa＿circ＿0016600转染肺腺癌细胞)、Si-TGFA组(Si-TGFA转染肺腺癌细胞)、miR-NC组(miR-1298-NC转染肺腺癌细胞)、miR-mimics组(miR-1298-mimics转染肺腺癌细胞)、miR-inh组(miR-1298-inhibitors转染肺腺癌细胞)、Si-circ+miR-NC组(Si-circ、miR-NC转染肺腺癌细胞)、Si-circ+miR-inh组(Si-circ、miR-inh转染肺腺癌细胞)、si-NC+miR-NC组(si-NC、miR-NC转染肺腺癌细胞)、miR-NC+pcDNA3.1组(miR-1298-NC、pcDNA3.1转染肺腺癌细胞)、miR-mimics+TGFA组(miR-mimics、TGFA转染肺腺癌细胞)和miR-mimics+pcDNA3.1组(miR-mimics、pcDNA3.1转染肺腺癌细胞)。应用克隆形成实验、划痕实验及Transwell侵袭实验检测上述干预对细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响；通过蛋白免疫印迹法检测经上述分组干预后对目的蛋白TGFA表达的影响。结果 高通量测序筛选出在肺腺癌组织中高表达的环状RNA hsa＿circ＿0016600。克隆形成实验显示，A549和PC9中Si-circ组的克隆形成率[(2.07±0.40)、(2.90±0.40)]明显低于Si-NC组[(5.33±0.35)、(7.30±0.36)],差异有统计学意义(P<0.05);细胞划痕实验表明，A549和PC9细胞中Si-circ组的迁移率较Si-NC组明显降低(P<0.05);Transwell侵袭实验显示，A549和PC9细胞中Si-circ组的侵袭细胞数明显低于Si-NC组(P<0.05)。A549和PC9中Si-TGFA组的克隆形成率、侵袭细胞数、迁移率明显低于Si-NC组(P<0.05)。与Si-circ+miR-NC组比较，Si-circ+miR-inh组细胞克隆形成率在A549细胞及PC9细胞中明显升高(P<0.01);划痕实验显示，Si-circ+miR-inh组A549及PC9的迁移率较Si-circ+miR-NC组增高(P<0.01);侵袭实验表明，Si-circ+miR-inh组A549及PC9侵袭细胞数较Si-circ+miR-NC组明显增多(P<0.01)。miR-mimics+TGFA组TGFA的表达、侵袭细胞数、细胞迁移率较miR-mimics+pcDNA3.1组增加(P<0.01)。结论 Hsa＿circ＿0016600/miR-1298/TGFA轴促进人肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭，为肺腺癌的治疗提供新的理论依据。

• 单位
  江苏大学; 江苏大学附属人民医院