表达SARS-CoV-2的RBD基因及多表位基因重组DNA候选疫苗的构建及小鼠免疫效果评价

作者：孙世宇; 李卓昕; 哈卓; 陈璐儿; 刘宇梦; 李晓宁; 鲁会军; 金宁一

来源：中国病原生物学杂志, 2022, 17(01): 1-4+8.

DOI：10.13350/j.cjpb.220101

• 新型冠状病毒
• 受体结合域蛋白
• 抗原表位蛋白
• 免疫原性

目的 构建针对新型冠状病毒的重组核酸苗，评价其与佐剂联合免疫BALB/c小鼠的效果。方法 选择新型冠状病毒S蛋白的受体结合域蛋白基因（RBD）和新冠病毒S、M、N、E 4个结构蛋白的抗原表位基因（EPI）为主要抗原基因，以pVAX1为载体，分别构建pVAX-RBD-EPI质粒和pVAX-RBD质粒。用2种重组质粒和pVAX空载体质粒分别与PIKCA佐剂联合免疫或无佐剂免疫BALB/c小鼠，共免疫3次，间隔21天免疫，每7 d对小鼠特异性抗体进行检测；对三免后21 d小鼠脾淋巴细胞进行T淋巴细胞亚类检测。结果 成功构建了重组质粒pVAX-RBD-EPI和pVAX-RBD。用重组质粒转染BHK细胞，Western blot显示重组核酸质粒稳定表达目的蛋白。BALB/c小鼠免疫结果表明，三免后14d时pVAX-RBD-EPI+PIKCA组IgG抗体水平为无佐剂组的3.65倍（P+/CD4+T达到55.71%,是阴性对照组的1.52倍（P+/CD8+T数量pVAX-RBD-EPI+PIKCA组为7.07%,是阴性对照组的1.83倍，是pVAX-RBD-EPI组（5.86%）的1.2倍（P<0.05）。结论 成功构建重组DNA候选疫苗pVAX-RBD-EPI和pVAX-RBD-EPI。两种疫苗均具有良好的免疫原性，其中PIKCA免疫佐剂的加入可增强小鼠细胞免疫和体液免疫水平。

• 单位
  中国农业科学院; 广西大学