西达本胺联合PD-1抑制剂对结直肠癌小鼠CD8~(+ )T细胞抗肿瘤功能的影响

作者：董亮; 李祥; 高志涛; 贾慧婕^*; 赵铁锁^*

来源：解放军医学杂志, 2023, 1-12.

• T淋巴细胞
• 免疫检查点抑制剂
• 程序性死亡受体-1
• 西达本胺

目的 探讨组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂西达本胺联合程序性死亡受体-1(PD-1)抑制剂对结直肠癌小鼠模型(MC38-OVA)中CD8+T细胞抗肿瘤功能的影响。方法 动物实验：采用背部皮下注射法构建MC38-OVA结直肠癌小鼠肿瘤模型。将MC38-OVA荷瘤小鼠随机分为对照组、西达本胺组、anti-PD-1组、西达本胺+anti-PD-1组，每组20只。观察荷瘤小鼠肿瘤生长情况及存活率；采用流式细胞仪检测小鼠肿瘤微环境中CD8+T细胞、CD8+IFN-γ+T细胞、OVA抗原特异性CD8+T细胞的数量及比例，及肿瘤组织内调节性T细胞(Treg)、髓系衍生抑制细胞(MDSC)、肿瘤相关巨噬细胞(TAM)的表达变化。细胞实验：采用流式细胞仪检测0、10、25、50、100、200nmol/L西达本胺处理的CD8+T细胞及MC38-OVA肿瘤细胞的凋亡情况。采用流式细胞计数法及Ki-67抗体标记法检测0、100 nmol/L西达本胺处理的CD8+T细胞及MC38-OVA肿瘤细胞的增殖情况。取CD8+T细胞，设置对照组、西达本胺组、anti-PD-1组与西达本胺+anti-PD-1组，与MC38-OVA肿瘤细胞按预设效靶比共培养，采用流式细胞仪检测CD8+T细胞的杀伤能力。经0、100 nmol/L西达本胺处理的CD8+T细胞与相同数量的MC38-OVA肿瘤细胞共培养，采用流式细胞仪检测CD107a的表达。结果 荷瘤小鼠肿瘤生长及生存分析结果显示，与对照组比较，西达本胺+anti-PD-1组荷瘤小鼠肿瘤生长明显抑制(P<0.05)，生存率明显增高(P<0.01)。西达本胺组、anti-PD-1组、西达本胺+anti-PD-1组肿瘤浸润CD8+ T细胞比例及数量明显高于对照组(P<0.05)。西达本胺+anti-PD-1组CD8+IFN-γ+、OVA抗原特异性CD8+T细胞比例及数量明显高于对照组、西达本胺组、anti-PD-1组(P<0.05)。体外实验显示，西达本胺可增强CD8+ T细胞的杀伤能力及CD107a的表达(P<0.05)。结论：西达本胺联合PD-1抑制剂可明显增强瘤内浸润CD8+ T细胞数量及功能，诱导抗原特异性CD8+ T细胞数量增加，减轻小鼠肿瘤负荷。

• 单位
  基础医学院; 新乡医学院; 解放军总医院