嵌合猫杯状病毒F9株感染性克隆的构建及病毒拯救

作者：左智敏; 康洪涛; 吴红霞; 祖少坡; 田进; 刘永相; 倪宏波; 曲连东^*

来源：中国预防兽医学报, 2019, 41(07): 759-766.

• 猫杯状病毒
• F9株
• 感染性克隆
• 病毒拯救

为构建猫杯状病毒(FCV)弱毒株F9的感染性克隆,本研究利经PCR分段扩增了FCV各基因片段,并拼接出FCV F9全基因组序列。经测序显示,其1823位多出一个碱基造成该序列存在移码突变,经替换为pOK-2280 (已构建出的FCV强毒株的感染性克隆)相应序列并对差异氨基酸逐个突变,最终获得嵌合FCV F9全基因组的重组质粒pOK-F9H。将线性化的pOK-F9H体外转录,获得的加帽RNA转染F81细胞,得到了拯救病毒rFCV F9。经过对拯救病毒与亲本病毒的蚀斑形成能力、CPE形成能力和多步生长曲线分析,结果显示rFCV F9与亲本株在复制能力和体外生长能力方面基本一致,表明构建了嵌合FCV F9株的感染性克隆并拯救出重组病毒。本研究构建的嵌合FCV F9株感染性克隆可以为FCV的基因功能研究以及新型FCV疫苗的研发奠定基础。

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 动物科技学院; 黑龙江八一农垦大学; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所