二十二碳六烯酸通过活化T细胞核因子1调控低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞表型转化

作者：谢其非; 陈蕊; 卢毅; 严金川; 刘朔; 李梅; 宋娟; 邵晨; 王中群; 刘培晶^*

来源：中华心血管病杂志, 2017, 45(02): 148-153.

• 肺动脉
• 肌细胞, 平滑肌
• 二十二碳六烯酸类

目的探讨二十二碳六烯酸(DHA)调控低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC)表型转化的分子机制。方法采用组织贴块法培养大鼠PASMC。将PASMC分为常氧组、低氧组(1%O2、94%N2、5%CO2, 低氧刺激12 h)、低氧(1%O2、94%N2、5%CO2)+DHA(10 μmol/L)组(给予DHA处理后低氧孵育12 h), 低氧(1%O2、94%N2、5%CO2)+DHA(10 μmol/L)+过表达NFATc1组(细胞转染过表达NFATc1载体24 h, 然后再给予DHA及低氧刺激12 h)及低氧(1%O2、94%N2、5%CO2)+DHA(10 μmol/L)+敲低NFATc1组(细胞转染NFATc1小干扰RNA 24 h, 然后再给予DHA及低氧刺激12 h)。使用三气培养箱制造低氧环境加以干预。分别采用实时定量PCR和Western blot法检测各组细胞的NFATc1mRNA和蛋白表达水平, 分别采用免疫荧光染色、Western blot和实时定量PCR法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平, 采用实时定量PCR法检测平滑肌肌动蛋白相关蛋白22(SM22)mRNA表达水平, 采用5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EDU)法检测PASMC增殖情况。结果低氧刺激12 h, 低氧组大鼠PASMC NFATc1的mRNA及蛋白表达水平均明显高于常氧组(P均<0.05), 而低氧+DHA组则均明显低于低氧组(P<0.05)。转染NFATc1过表达病毒及小干扰RNA 24 h后, 低氧刺激大鼠PASMC 12 h, 低氧组大鼠PASMC α-SMA阳性的细胞数、α-SMA蛋白及mRNA以及SM22 mRNA表达水平均明显低于常氧组(P均<0.05), 低氧+DHA组则高于低氧组(P<0.05), 低氧+DHA+过表达NFATc1组则明显低于低氧+DHA组(P<0.05), 而低氧+DHA+敲低NFATc1组又明显高于低氧+DHA+过表达NFATc1组(P<0.05)。低氧组大鼠PASMC增殖率明显高于常氧组(P<0.05), 低氧+DHA组则明显低于低氧组(P<0.05), 低氧+DHA+过表达NFATc1组则明显高于低氧+DHA组(P<0.05), 而低氧+DHA+敲低NFATc1组又明显低于低氧+DHA+过表达NFATc1组(P<0.05)。结论 DHA可通过抑制NFATc1调控低氧诱导的大鼠PASMC由收缩型向合成型转化及增殖。

• 单位
  江苏大学附属医院