摘要

为分析泽漆水提取物对猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)的体外抑制作用,本研究使用CCK-8法检测泽漆水提取物对非洲绿猴肾细胞(Vero CCL-81)增殖活力的影响,通过间接免疫荧光、蛋白免疫印迹、实时荧光定量PCR方法检测泽漆水提取物对PEDV的抑制作用和时间依赖关系。以广谱抗病毒药利巴韦林(Ribavirin)为阳性对照药物,探究泽漆水提取物对PEDV生命周期各个阶段的影响。结果表明:1)泽漆水提取物浓度≤500μg/mL时在12、24和36 h无细胞毒性。2)泽漆水提取物以剂量依赖方式显著降低PEDV-N mRNA的表达量及PEDV病毒滴度。3)泽漆水提取物可长时间有效抑制PEDV-N蛋白的表达,预防给药对PEDV-N蛋白表达无明显抑制效果。4)泽漆水提取物在病毒生命周期的吸附及复制增殖阶段对PEDV-N蛋白的表达具有显著抑制作用,在入侵阶段对PEDV-N蛋白的表达无明显抑制效果。综上,泽漆水提取物在体外对PEDV具有显著抑制作用,主要作用于PEDV生命周期的吸附和复制增殖阶段。本研究为深入挖掘泽漆抗病毒优势奠定了基础。