大鼠足细胞的原代培养及鉴定

作者:贾苗; 张益民; 赖德源
来源:第三军医大学学报, 2010, 32(23): 2565-2567.
DOI:10.16016/j.1000-5404.2010.23.009

摘要

目的建立一种重复性好、操作简便的大鼠足细胞培养方法。方法取体质量200~220g的健康雌性SD大鼠,无菌取肾后通过差异过筛法分别通过80、150、200目细胞筛网,收集200目筛网上肾小球进行接种,利用植块法将接种培养面向上放置,4.5h后将培养瓶翻转过来正常放置于37℃、5%CO2的恒温恒湿培养箱进行孵育。采用形态学观察和细胞间接免疫荧光技术,对足细胞进行鉴定,并用流式细胞仪进行足细胞纯度分析。结果 5d后可见绝大部分肾小球贴壁并有少许肾小球周围有细胞爬出,7~8d可见所有肾小球周围有大量细胞爬出,胰酶消化后传代培养。形态学及特异性抗体WT-1、nephrin鉴定为足细胞。流式细胞仪分析细胞...

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