胶原酶优化消化法对退变椎间盘纤维环细胞分离培养的作用

作者：冯旭; 禹宝庆; 刘莉; 李承; 陈安民

来源：颈腰痛杂志, 2013, 34(05): 361-364.

• 胶原酶
• 优化消化法
• 纤维环细胞
• 分离培养

目的通过观察不同浓度Ⅰ、Ⅱ型胶原酶对退变椎间盘纤维环组织消化效果,探讨适合于纤维环细胞分离培养的优化消化法。方法收集16例退变椎间盘纤维环组织,Ⅰ、Ⅱ型胶原酶单独消化并在0.1%,0.05%,0.01%浓度下联合消化。消化4、8、16、24 h时倒置显微镜下计算纤维环细胞数,台盼蓝染色检查其活力,并观察其生长情况。结果Ⅰ、Ⅱ型胶原酶联合消化细胞数多于单独消化细胞数。联合消化4、8 h时,细胞数随胶原酶消化浓度增加而增多,16、24 h时极低浓度组纤维环细胞数逐渐增多,细胞活力维持在较高水平。结论极低浓度Ⅰ、Ⅱ型胶原酶优化消化法能节省酶量,对细胞损伤小,更适合纤维环细胞分离培养。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院; 上海市浦东医院; 复旦大学附属浦东医院