摘要

本申请涉及生物技术领域,具体公开了一种第三咽囊内胚层的培养方法及应用。采用本申请的分化培养基培养获得第三咽囊内胚层的细胞纯度能达到90%以上;第三咽囊内胚层细胞可在体外分化出成熟的MHC-II和EpCAM双阳性的、包括皮质胸腺上皮细胞和髓质胸腺上皮细胞的功能性胸腺上皮细胞,采用通过筛选确定的添加物,调控多种传导信号实现;第三咽囊内胚层来源的胸腺上皮细胞在体外具有促进T细胞发育的能力。本申请通过建立胸腺上皮细胞和造血干细胞的新型共培养方法,证明在体外分化的胸腺上皮细胞具有支持T细胞发育的功能;在体外促进造血干细胞分化为成熟的T细胞,并产生CD4阳性T细胞、CD8阳性T细胞。