环介导等温扩增技术检测柔嫩艾美耳球虫二氢蝶酸合酶N377D突变

作者：耿天天; 王雅乐; 罗莉妍; 申邦; 方瑞; 胡敏; 赵俊龙; 周艳琴^*

来源：中国兽医学报, 2022, 42(08): 1607-1611.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2022.08.13

• 鸡球虫病
• 耐药性
• 环介导等温核酸扩增技术
• 单核苷酸多态性

面对日益严重的磺胺类药物的耐药性，传统的耐药性检测方法已不能满足临床需求，因此开发一种磺胺耐药柔嫩艾美耳球虫检测方法十分必要。本试验建立一种使用环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)来准确区分柔嫩艾美耳球虫二氢蝶酸合酶(dihydropteroate synthase, DHPS)基因中的点突变(A1129G)的方法。对LAMP反应进行优化，发现在68℃,60 min时，反应的灵敏度和特异性均达到最佳。此时，该方法的最低检测限40 fg,并对5种病原体显示出特异性。在检测的所有46个现场样品中，有43个为阳性结果。

• 单位
  华中农业大学; 农业微生物学国家重点实验室