PD98059和LY294002对非酶糖基化终产物诱导人RPE细胞表达VEGF的影响

作者：杨晓春; 许建彪; 唐罗生

来源：眼科新进展, 2014, 34(09): 817-825.

DOI：10.13389/j.cnki.rao.2014.0226

• 糖基化终产物
• 丝裂素活化蛋白激酶
• 磷脂酰肌醇-3激酶
• 色素上皮
• 信号通路

目的观察p44/42 MAPK激酶抑制剂PD98059和PI3K/Akt激酶抑制剂LY294002对非酶糖基化终产物(advanced glycation end-products,AGE)诱导的人视网膜色素上皮细胞株ARPE-19细胞表达血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的影响。方法分别用不同浓度AGE和AGE作用不同时间干预ARPE-19细胞,ELISA方法检测ARPE-19细胞外VEGF蛋白表达水平,免疫细胞荧光法检测磷酸化p44/42和Akt的表达;以PD98059和(或)LY294002预处理ARPE-19细胞后再用AGE干预,并测定ARPE-19细胞外VEGF水平、磷酸化p44/42和Akt活性。结果随着AGE浓度或作用时间增加,ARPE-19细胞表达VEGF外增加,AGE浓度为100mg·L-1或作用8h时达高峰,表达水平分别为(304.55±20.51)ng·L-1、(293.54±13.98)ng·L-1,同时p44/42和Akt信号分子激活。使用PD98059或LY294002预处理后,p44/42和Akt低表达,AGE诱导的ARPE-19细胞外VEGF表达也降低,并与PD98059和LY294002呈剂量依赖性,当使用20μmol·L-1 PD98059和30μmol·L-1 LY294002时,VEGF的表达最低,分别为(57.35±5.29)pg·L-1、(81.51±8.10)pg·L-1,但VEGF的表达量仍与AGE浓度和作用时间呈正相关(P<0.01);同时使用PD98059和LY294002预处理,AGE诱导的VEGF表达与AGE的作用时间无关(P>0.05)。结论 p44/42MAPK和PI3K/Akt信号通路是AGE诱导ARPE-19细胞表达VEGF的重要细胞内信号通路,PD98059和LY294002可抑制AGE诱导的人RPE细胞外VEGF表达。

• 单位
  中南大学湘雅二医院; 云南省第一人民医院