科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的:观察成牙本质细胞中是否表达成纤维细胞生长因子18。方法:实验于2005-02/04在解放军第四军医大学口腔医院口腔内科实验室完成。①小鼠成牙本质样细胞系MDPC-23培养:细胞培养在含体积分数为0.1的胎牛血清α-MEM、青霉素l00IU/mL、链霉素l00mg/L和谷氨酰胺50mg/L的完全培养液中,同时附加50mg/L抗坏血酸。②免疫组织化学染色:一抗用1∶100稀释的成纤维细胞生长因子18多克隆抗体,4℃湿盒过夜,最后滴加二氨基联苯胺液显色。以磷酸盐缓冲液代替一抗设为阴性对照。成纤维细胞生长因子18阳性表达细胞胞浆呈棕黄色。③免疫荧光染色:一抗用1∶50稀释的羊抗小鼠成纤维细胞生长因子18多克隆抗体,4℃湿盒过夜后滴加按1∶500稀释的FITC标记的兔抗羊二抗。阴性对照用磷酸盐缓冲液代替一抗进行染色。成纤维细胞生长因子18阳性表达细胞在荧光显微镜下发出绿色荧光。结果:免疫荧光和免疫组织化学法均表明成纤维细胞生长因子18在MDPC-23细胞浆呈阳性表达。结论:从蛋白水平证实了成牙本质样细胞MDPC-23表达成纤维细胞生长因子18,提示成纤维细胞生长因子18可能是影响成牙本质细胞分化的胞内信号转导分子。
-
单位第四军医大学
