分泌型核心蛋白聚糖真核表达载体的构建及鉴定

作者：张玉成; 杜珍武; 王雅丽; 卜丽莎; 吕俊峰; 张桂珍

来源：吉林大学学报(医学版), 2008, (02): 354-356.

• 核心蛋白聚糖
• 聚合酶链反应
• 克隆
• 基因表达

目的:构建分泌型核心蛋白聚糖(DCN)真核表达载体,为研究DCN的生物学功能奠定基础。方法:利用特异性引物,应用PCR技术扩增DCN全长基因cDNA片段,与pcDNA3.1载体进行连接,并转化到大肠杆菌JM109中扩增以获得重组载体,应用双酶切、PCR以及测序鉴定此重组载体。结果:获得了约1080bp大小的特异性DNA片段;PCR产物与真核表达载体进行连接,经过双酶切、PCR以及测序鉴定证实分泌型DCNcDNA片段正确插入真核表达载体pcDNA3.1中。结论:成功克隆了分泌型DCNcDNA,并且构建了真核表达载体pcDNA3.1-DCN。

• 单位
  吉林大学; 吉林大学中日联谊医院