摘要
目的构建2型糖尿病(T2DM)小鼠及高糖诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤模型,观察荠菜提取物(CBP)对T2DM血管损伤的作用。方法雄性昆明小鼠60只,随机取10只作为正常对照组,其余小鼠均以高糖高脂饲料结合小剂量链脲佐菌素(STZ)制备T2DM模型小鼠。选取建模成功小鼠30只,随机分为T2DM组、阳性对照(二甲双胍)组和CBP低、中、高剂量组(0.75、1.5、3 g·kg-1),每组6只,灌胃8周后,检测各组小鼠空腹血糖(FBG)、低密度脂蛋白(LDL)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)及NO含量,ELISA法检测血清中胰岛素、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量,Real-time PCR法检测小鼠胸主动脉Caspase-3 mRNA的表达。建立高糖诱导HUVECs损伤模型,分为正常对照组、高糖组、溶剂对照组、高糖+CBP(0.25、0.5、1 mg·mL-1)组,MTT法检测HUVECs的活性,荧光探针DCFH-DA测定细胞内活性氧(ROS)水平、Griess Reagent法检测细胞上清液中NO的含量、Hoechst染色法检测细胞凋亡。结果动物实验中,与对照组比较,T2DM组FBG、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、LDL、TC、TG、MDA含量及血管组织中Caspase-3 mRNA的表达均升高(P<0.05),胰岛素敏感指数(HOMA-IS)、HDL、SOD、NO含量下降(P<0.05);各剂量CBP组对T2DM小鼠的FBG、HOMA-IR、HOMA-IS无明显改善作用;与T2DM组比较,各剂量CBP组TC、TG、MDA含量下降(P<0.05),SOD含量上升(P<0.05),CBP中、高剂量组LDL含量下降、HDL及NO含量升高(P<0.05),CBP高剂量组Caspase-3 mRNA的表达下降(P<0.05)。细胞实验中,与对照组比较,高糖组可导致HUVECs活性及NO含量下降(P<0.01),细胞凋亡率及ROS水平上升(P<0.01);与高糖组比较,CBP组能改善高糖导致的细胞活性及ROS水平下降的现象,减少细胞凋亡率(P<0.05),NO含量升高(P<0.05)。结论 CBP可抑制T2DM小鼠的血管损伤,其机制可能与其能改善血脂、减轻氧化应激、抑制血管内皮细胞凋亡有关。
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